2023年(nian)3月17日(ri)經國(guo)家市場監督管理(li)總局（國(guo)家標(biao)(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)化管理(li)委(wei)員會）批準(zhun)(zhun)(zhun)發布GB/T 5750-2023《生活飲用水標(biao)(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)檢(jian)驗方法》系列標(biao)(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)，代替實施16年(nian)之(zhi)久(jiu)的GB/T 5750-2006 《生活飲用水標(biao)(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)檢(jian)驗方法》。

新標(biao)準將于2023年(nian)10月1日(ri)起正(zheng)式實施。 GB/T 5750-2023標(biao)準歷時5年(nian)，經過了3輪意(yi)見征求，有(you)(you)280+單位參與研(yan)制與驗證，有(you)(you)超過500名行業專家參與的GB/T 5750修訂工作，最終(zhong)大功告成。

本次修(xiu)訂微生物指標主要內容：新(xin)增腸球菌(jun)和產氣莢(jia)膜梭狀芽孢桿菌(jun)兩個檢測(ce)指標、3種檢測(ce)方(fang)(fang)法和增加菌(jun)落(luo)總數酶底物法新(xin)方(fang)(fang)法。

其(qi)中產氣莢(jia)膜梭狀(zhuang)芽孢桿(gan)菌是新增檢(jian)(jian)測(ce)指標，有些(xie)老(lao)師不清楚檢(jian)(jian)測(ce)過程中需要用到哪些(xie)設備(bei)，我們(men)根據標準(zhun)的要求做個簡單(dan)介紹(shao)。

根據(ju)標(biao)準要(yao)求(qiu)我們需要(yao)準備以下儀(yi)器和耗材：

1.  電子天平：實驗室常用儀(yi)器

2.  pH計(ji)或精密pH試紙(zhi)：實驗室常用儀器或耗(hao)材

3.  恒溫培(pei)養箱：實驗(yan)室常用儀器(qi)

4.  冰箱：實(shi)驗室常用儀器(qi)

5.  恒溫水浴箱：實驗室常(chang)用儀(yi)器

6.  顯微鏡：實驗(yan)室常用儀器(qi)

7.  無菌吸管：實驗室常(chang)用(yong)耗材或儀(yi)器

8.  無菌試管：實驗室(shi)常用耗材

9.  無菌平皿：實驗室(shi)常用耗材(cai)

10. 厭氧培養裝置：華端生物HD-AN系列智(zhi)能(neng)厭(yan)氧微需氧培養系統

11. 過濾設備：華端(duan)生物HD-F系列水中微(wei)生物膜過濾裝(zhuang)置

12. 濾膜:實驗室常(chang)用耗材

13. 無(wu)齒鑷子：實驗室常用(yong)耗材(cai)

其他會用到的設備：HD-C系(xi)(xi)(xi)(xi)列菌落(luo)計數(shu)儀、HD-DT系(xi)(xi)(xi)(xi)列自動樣品稀釋(shi)儀、HD-GM系(xi)(xi)(xi)(xi)列全自動革蘭氏染色儀、HD-S系(xi)(xi)(xi)(xi)列自動培養基(ji)分(fen)裝儀、HD-MA系(xi)(xi)(xi)(xi)列自動微(wei)生物生化鑒定(ding)系(xi)(xi)(xi)(xi)統(tong)

產氣莢膜(mo)梭狀芽孢桿菌檢測流程圖(tu)

一、 樣(yang)品(pin)

1. 污(wu)染較輕(qing)的水(shui)樣，可直接(jie)取100 ml水(shui)樣進行檢驗(yan)。

2. 污(wu)染嚴重的水(shui)樣，可使用0.1%緩(huan)沖蛋白胨(dong)水(shui)將水(shui)樣按10倍系列稀釋，取(qu)100ml進行檢驗。

使用華(hua)端生物HD-DT系列(lie)自(zi)動(dong)樣品稀(xi)釋(shi)儀：自動(dong)稱(cheng)重，自動(dong)按比例稀釋。

二(er)、 過(guo)濾水(shui)樣

先用無(wu)菌鑷子(zi)夾取無(wu)菌濾膜(mo)邊緣部分，將濾膜(mo)正面(mian)朝(chao)上(shang)貼放在已滅菌的濾床上(shang)，固(gu)定好濾器(qi)(qi)，將100 ml水樣注入(ru)濾器(qi)(qi)中，打開(kai)濾器(qi)(qi)閥門，在-5.07X104Pa(-0.5 個大(da)氣壓(ya))下抽(chou)濾。每次試驗均需要用100 mL0.1%緩沖蛋白胨水講行空(kong)白對(dui)照。

使用華(hua)端生物(wu)HD-F系(xi)列水中微生物(wu)膜過濾裝置：配備直排泵(beng)，無(wu)需廢液(ye)瓶，直排廢液(ye)；火焰滅(mie)菌支架(jia)和濾杯，提高實驗效(xiao)率。

三、厭氧培(pei)養

過濾(lv)(lv)(lv)完水(shui)樣后，關上濾(lv)(lv)(lv)器(qi)閥門，取下濾(lv)(lv)(lv)器(qi)，用無菌(jun)鑷子夾取濾(lv)(lv)(lv)膜(mo)(mo)邊(bian)緣部分(fen)，移濾(lv)(lv)(lv)膜(mo)(mo)倒置(zhi)在SPS瓊脂培(pei)養(yang)基(ji)上，濾(lv)(lv)(lv)膜(mo)(mo)截(jie)留細(xi)菌(jun)面與培(pei)養(yang)基(ji)貼緊，避免氣泡產(chan)生，然后將平皿(min)倒置(zhi)于厭(yan)氧培(pei)養(yang)裝置(zhi)內，于36℃±1℃厭(yan)氧培(pei)養(yang)18 h~ h，計數(shu)黑色菌(jun)落數(shu)。

使用華(hua)端生物HD-AN系(xi)列智能厭氧微需氧培養系(xi)統：使用靈活、成(cheng)本低，培養效(xiao)果有保障，操作簡單、智(zhi)能。

四、 菌落計數

對濾膜上(shang)證實為(wei)產(chan)氣(qi)莢膜梭狀芽孢(bao)桿菌(jun)的菌(jun)落進(jin)行計數

使用華端生(sheng)物HD-C系列(lie)菌落(luo)計數儀：手動菌落計數器輔助計數，操作方便；全自動菌落計數儀(yi)：軟件(jian)自動計數(shu)，計數(shu)快捷、準確。

五、 細菌(jun)鑒定

用上述培養(yang)液(ye)涂片，革蘭氏染(ran)色(se)、鏡檢。產(chan)氣莢膜(mo)梭(suo)狀芽(ya)孢(bao)桿菌(jun)(jun)為革蘭陽性粗大桿菌(jun)(jun)，其耐熱菌(jun)(jun)株可能(neng)形(xing)成卵形(xing)芽(ya)抱,位(wei)于菌(jun)(jun)體中央或近端，其寬(kuan)(kuan)度一般不(bu)超過菌(jun)(jun)體寬(kuan)(kuan)度。

使用華端生物(wu)HD-GM系列全自動革蘭氏(shi)染(ran)色(se)儀：自動(dong)化(hua)的染色儀使革蘭氏染色實驗自動(dong)化(hua)、標準化(hua)，批量(liang)大時(shi)可(ke)節約大量(liang)時(shi)間。

使用華(hua)端生(sheng)(sheng)物HD-MA系(xi)列自(zi)動微生(sheng)(sheng)物生(sheng)(sheng)化鑒定系(xi)統：標準(zhun)化(hua)的試劑操作，儀器(qi)自(zi)動判讀(du)結果，避免(mian)人工判讀(du)偏差。

六(liu)、 其他儀器

使用華端(duan)生物HD-S系列自動培養基(ji)分裝儀：自動分(fen)裝培養(yang)基(ji)或者其他微生物試劑，方便、快速。

使用華端生物HD-M系列(lie)微生物質譜快速鑒定儀：相比傳統(tong)鑒定(ding)方(fang)式更快出結果、準(zhun)確性更高、操作更簡單(dan)、檢(jian)測范(fan)圍更廣。

杭(hang)州(zhou)華端生物(wu)科(ke)技有限公司(si)創始(shi)團隊十多年來(lai)一直專注于為(wei)用戶提供(gong)有競爭力的(de)食品(pin)、藥品(pin)、醫療及科(ke)研微(wei)生物(wu)實驗室的(de)整體(ti)解決方(fang)案與服務。

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